TB培养基是什么?
TB培养基,全称为Terrific Broth培养基,是一种常用于分子生物学和生物技术领域的液体培养基,特别适合于大肠杆菌等细菌的高密度培养。与传统的LB培养基相比,TB培养基的营养成分更为丰富,其名称“Terrific”本身就带有“极好的、惊人的”之意,形象地说明了它在促进细菌快速生长和获得高产量蛋白质方面的卓越性能。
TB培养基的组成与原理
TB培养基的配方核心包含三部分:首先是一种由胰蛋白胨和酵母提取物组成的复合氮源,为细菌生长提供丰富的氨基酸、多肽和维生素;其次是磷酸盐缓冲系统,通常为磷酸二氢钾和磷酸氢二钾,它能有效稳定培养环境的pH值,防止细菌在高速代谢过程中产生的有机酸导致培养基过度酸化,从而维持细菌的持续对数生长;最后是甘油,作为一种额外的碳源和能量物质,进一步支持细菌的高密度繁殖。这种优化的组合使得TB培养基能够支持比LB培养基高出数倍的细胞密度。
主要应用与注意事项
TB培养基最主要的应用是在重组蛋白表达领域。当研究人员需要利用大肠杆菌表达大量目标蛋白(例如用于结构研究或药物开发的蛋白质)时,TB培养基往往是首选。它能支持细菌生长到更高的光密度值,从而在诱导表达后获得更大量的目标蛋白。在使用时,通常需要将培养基高压灭菌,待冷却后再无菌加入过滤除菌的甘油溶液。需要注意的是,由于其营养丰富,细菌在其中生长速度极快,因此对培养的通气条件(如摇床转速和装液量)要求较高,以确保充足的氧气供应,避免厌氧环境产生。
